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      EDTA(二鈉,溶液配制,溶解度,作用)

      Release Time:2022-10-06

      EDTA作用:
      ※ EDTA是一種化學螯合劑,可以螯合二價金屬離子,如Ca2+和Mg2+。
      ※ EDTA溶液也稱為Versene溶液。由于Ca2+和Mg2+是細胞膜的重要組成部分,具有凝集細胞的功能,EDTA可以破壞細胞之間的連接,促進細胞分裂為單個細胞。
      ※ EDTA毒性較小,價格低廉,使用方便,并且不會破壞細胞表面分子。
      ※ EDTA只與Ca2+和Mg2+結合,因此適用于需要檢測細胞表面分子的細胞消化。它還經常與胰蛋白酶溶液按一定比例混合。
      ※ EDTA產品:液體濃度:0.02%pH:7.2-7.4酚紅:陰性溶劑:10mM PBS EDTA:0.2g/L儲存:2-8°C裝運:RT有效期:18個月。

      EDTA溶液配制步驟:
      如果你想配制1L,0.2%EDTA溶液,取800ml。
      1. 添加EDTA.2Na。2H2O(見表)。
      2. 將燒杯放在帶有磁性顆粒的磁力攪拌器上。保持pH探針監測pH值。
      3. 加入75%的NaOH顆粒(以20g/L為基礎計算粗制量,制成0.5M)。
      4. 讓氫氧化鈉完全溶解。同時檢查二水EDTA二鈉的溶解情況。
      5. 依次加入其余的氫氧化鈉顆粒。不要試圖一次添加大量內容。你可能會超過pH值。
      6. EDTA完全溶解后,檢查pH值。必要時使用HCl。
      7. 將溶液轉移到量筒中并調整體積。
      8. 通過過濾器滅菌(0.22微米)或高壓滅菌進行滅菌。
      摩爾濃度 100 ml 250 ml 500 ml 1000 ml
      100 mM 3.72 g 9.30 g 18.61 g 37.22 g
      0.25 M 9.31 g 23.26 g 46.53 g 93.06 g
      0.5 M 18.61 g 46.53 g 93.06 g 186.12 g

      EDTA用途:
      1. 在化學水平上,EDTA 與金屬離子形成配位化合物,從而使它們失活。
      2. 生物化學家使用EDTA用于提高或降低酶的活性。
      3. 無機化學家使用它作為化學緩沖液。
      4. EDTA(鈉鈣EDTA)的變體用于治療鉛(Pb)和汞(Hg)中毒。
      5. EDTA還可用作加工食品和化妝品的防腐劑。
      6. TAE、TBE、DNA負載染料、Tris-EDTA、胰蛋白酶EDTA的成分。
      EDAT用途的案例:
      1. 
      提高或降低酶的活性案例:
      DNA聚合酶的活性需要Mg2+。溶液中存在EDTA會導致Mg2+的隔離。這最終使Mg2+無法用于DNA聚合酶,從而降低其活性。EDTA的螯合性能在DNA分離時是一個優勢(降低DNA酶活性以防止DNA降解),而在PCR中是一個劣勢(需要DNA聚合酶活性)。
      2. 提高酶的活性案例:
      胰蛋白酶EDTA用于通過破壞細胞間基質,從貼壁細胞培養物中制備單細胞懸浮液(去除電鍍細胞)。鈣和鎂離子可增強細胞間粘附。胰蛋白酶混合物中存在EDTA,可以隔離增強基質的離子。捕獲這些離子會削弱相互作用并促進胰蛋白酶消化。
      3. EDTA溶解度.
      對于大多數應用,EDTA.2Na。使用pH 8.0的2H2O溶液。EDTA在中性pH下的溶解度很低,因此必須將溶劑(H2O)的pH值提高到8才能增加溶解度。
      用于制備0.5M EDTA.2Na。2H2O溶液,大約需要20g NaOH。您可以以顆粒形式添加NaOH或10N NaOH溶液。如果pH過高,則使用HCl。
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