GelGreen熒光核酸染料

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GelGreen 實驗方法：
膠染法（前染法）
1. 照常制備瓊脂糖凝膠，加入濃縮的10000X GelGreen ，使凝膠中的終濃度為1X（例如制備100ml凝膠，加入染料5μl-10μl，用量可根據實際情況調整），輕輕搖晃，倒入膠水。
1Kb以上的Marker，建議減半用量。
2. 按照常規方法進行電泳，觀察結果。

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GelGreen® 和 SYBR Safe 在 1% 瓊脂糖/TBE 凝膠電泳后染色中的比較。

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泡染法（后染法）
1. 按照常規方法進行電泳。
2. 用 dH2O 將 10000X GelGreen 濃縮液稀釋約 3300 倍至 0.1M NaCl，制成 3X 染色液。 （例如，將 15μl 10000X GelGreen 濃縮液和 5ml 1M NaCl 添加到 45ml dH2O 中）。
3. 小心地將凝膠放入合適的容器中，緩慢加入足量的 3X 染色液以浸沒凝膠。在室溫下搖晃約 30 分鐘。最佳染色時間取決于凝膠厚度和瓊脂糖，濃度略有不同。 3.5-10%丙烯酰胺膠，染色時間一般在30min到1小時之間，再觀察結果。
 

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GelGreen注意事項：
1.由于GelGreen具有良好的熱穩定性，可直接加入熱的瓊脂糖溶液中，無需等待溶液冷卻。搖晃、振蕩或翻轉以確保染料充分混合。或者，可以將 GelGreen原液加入瓊脂糖粉末和電泳緩沖液中，然后在微波爐中加熱或其他常用方法制備瓊脂糖凝膠。 GelGreen與所有常用的電泳緩沖溶液兼容。
2、如果總看到條帶分散或分離不理想，建議使用氣泡染色來確認問題是否與染料有關。如果染色后問題依舊，說明問題與染料無關，請嘗試：降低瓊脂糖濃度；選擇更長的凝膠；延長凝膠時間，確保邊緣清晰；改進取樣技術或選擇氣泡染色法。
3、GelGreen對玻璃器皿和非聚丙烯材料有一定的親和力。在稀釋、儲存和染色過程中建議使用聚丙烯容器。
4. 此方法不適用于預制聚丙烯酰胺凝膠。對于聚丙烯酰胺凝膠，請使用氣泡染色法。